《临床检验杂志》
血涂片的光学显微镜检查是血液细胞形态学检查的基本方法,特别是对于血液病的诊断,占有极重要的地位。众所周知,满意的血涂片是血细胞形态学检查的前提。然而,长期以来,临床上血涂片的制作一直沿用常规的方法,即通过医护人员进行手工涂片和染片程序制作血涂片,每制作一片大概需要15~20 min。根据国内医院统计调查结果显示,全国每天有几百万张血涂片需要进行白细胞检查。同时,医护人员的粗心或者误操作可能会导致血涂片的制作不规范,不能有效地形成单细胞层用以检验,或者由于推片时力量不均匀导致细胞破碎,这些都会对血液涂片的镜检结果产生影响[1]。此外,在高职医学检验技术、卫生检验与检疫专业的《临床检验技术》、《血液检验技术》专业课程教学中,很多实训项目均要用到学生自己的血涂片,譬如白细胞分类计数、手工网织红细胞计数、中性粒细胞碱性磷酸酶染色等。然而,在有限的课堂时间内,学生利用手工推片法制备的血涂片质量却不尽如人意,标准血涂片制作成功率不高,直接影响了实验结果的准确性及教学效果的提高[2]。
针对上述现状,笔者设计、研制了基于手工推片的新型半自动血液推片机,并对其进行了两次改良,进一步提升并验证了该仪器的性能,现报告如下。
1 设计背景
外周血涂片制作技术出现较早,可通过手工法和仪器法实现。然而,手工制作血涂片存在推片用力不均、力度过大易导致细胞破碎等缺陷,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。
目前,国内临床检验工作中已开始使用进口的全自动推片仪器,贝克曼库尔特、西森美康、西门子和ABX等公司也相继开发出多种全自动推片系统[3],然而这些主流的全自动推片仪器由于价格昂贵,不能在临床上得到广泛应用。国内外血涂片复检率普遍较低[4-6],因此即便国内不少三级医院有该类仪器也很少常规使用。对于一级医院,其主要业务是从事三大常规检查和部分常规生化项目,很少进行血涂片复检[7]。据了解,半自动制片设备在国外与全自动推片仪器一样,已广泛应用于临床检验实践中[8]。因此,从经济和实用角度来讲,半自动制片设备可在一级及较高等级医疗机构的临床检验工作中推广应用。
2 设计原理
以血涂片制作的手工推片工艺为设计基础,本推片机采用带有升降调节器的载玻片载台(已取得国家知识产权局实用新型专利[9]),即采用推片水平移动而载台下降的推片方式制作血涂片,确保了制作的血膜头、体、尾分明,体尾交界处细胞分布均匀,适用于细胞形态观察和白细胞分类计数。此外,重点解决了推片角度、力度以及血膜长度的控制工艺。经多次讨论并最终定下设计方案,然后利用Unigraphics(简称UG)机械设计软件制作设计实体图(图1),再进行样机制造及后续性能调试、改进。研制出的新型半自动血液推片机由机械系统、控制系统和电路系统三部分组成,其简要外部构造说明,见图2。该仪器与当今国外临床检验中广泛应用的全自动推片仪器[10]和半自动制片设备[8]相比(均采用固定的载玻片载台,且推片做曲线运动),具有设计新颖、结构简单、制造简便、操作便利等特点。实际使用时,依据血液标本血细胞比容(Hematocrit,Hct)的不同,通过设置推片工作频率(速度)和载台提升回延(下降)时间等参数,可制作出满意血涂片。
图1 新型半自动血液推片机设计实体图
图2 新型半自动血液推片机
3 改进方案
笔者在成功研制出新型半自动血液推片机,并进行了初步的操作测试,发现存在以下问题:① 装载推片的水平式滑竿在移动中运动不流畅,需要进一步检查水平导轨等部位;② 推片插槽前端距离推片机侧面较近,无法安装推片;③ 推片宽度与载玻片等宽,推片时无法在血涂片两侧保留约0.3 cm的空隙。于是,笔者对该推片机进行了初步改良:仔细检查了水平导轨,并再次对一侧导轨进行了精细加工,使得两侧导轨完全一致,从而保证了滑竿的水平运动更加流畅;将推片插槽外侧截取一半,方便了推片的安装和拆卸。此外,对所用推片进行改良,将推片的两角用镊子各掰掉2~3 mm,再在油石上平磨光滑。最后,对仪器运行参数进行研究和调整。
然而,在临床试用和教学应用中发现,该推片机制片效率较低,原因是从启动到最后推片和载台回到初始位置,该过程耗时长达15 s。为了使该仪器的制片过程更加省时、高效,笔者配合专业技术人员对仪器的软件程序进行了修改。